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人皮膚癌組織源性原代細胞
人皮膚癌組織源性原代細胞
規格:
貨期:
編號:MZ-4281
品牌:Mingzhoubio

活化細胞
凍存細胞
熒光標記細胞

規格:
T25瓶
凍存管

產品名稱 人皮膚癌組織源性原代細胞
商品貨號 MZ-4281
組織來源 中國成年病人手術后的皮膚癌組織。
規格 5×105cells/T25培養瓶
生長特性 貼壁
細胞污染 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌檢測陰性。
細胞描述 皮膚癌包括基底細胞癌、鱗狀細胞癌、惡性黑色素瘤、惡性淋巴瘤、特發性出血性肉瘤(Kaposi 肉瘤)、汗腺癌、隆突性皮膚纖維肉瘤、血管肉瘤等,其中以基底細胞癌和鱗狀細胞癌最為 常見,約占皮膚癌的90%。 在皮膚癌中以基底細胞癌最多見,占60%以上。
細胞傳代步驟 如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
細胞復蘇步驟 將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
細胞凍存步驟 待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,細胞變圓脫落后,加入2ml完全培養基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
組織學分類 在組織病理學上基底細胞癌可分為分化型與未分化型兩大類: 1、未分化型可表現為實性型、色素型、纖維化型或硬斑狀、淺表型。 (1)實性型可見多少不一、形態不同的癌腫團塊埋在真皮內; (2)色素型瘤細胞間有較多黑色素; (3)纖維化型或硬斑狀型具有顯著的結締組織增生,結締組織成條束地包繞瘤細胞群;淺 表型在表皮下有較多短小的花蕾狀瘤細胞團。 2、分化型可出現向毛發結構分化的角化型基底細胞癌,向皮脂腺分化的囊腫型基底細胞癌, 向大汗腺分化的腺樣基底細胞癌等。
病理分期 皮膚癌常見有鱗狀細胞癌和基底細胞癌: 1、鱗狀細胞癌:惡性程度較高,多發于頭頸、四肢、軀干等部位的皮膚、粘膜及皮膚粘膜 交界處,早期即可形成潰瘍,生長呈浸潤性,浸入深部組織時,常伴有化膿性感染和淋巴結 轉移。易在色素性干皮病、老年性角化病基礎上演變而來。 根據腫瘤中不典型鱗狀細胞所占比例,可將鱗狀細胞癌分成四度: I 度鱗癌:瘤組織不超過汗腺水平,不典型鱗狀細胞少于25%,有很多角珠,真皮內有明顯 的炎性反應; II 度鱗癌:癌細胞團界限不清,不典型鱗狀細胞約占25%~50%,只有少數角珠,角珠中 心多角化不全,周圍炎癥反應較輕; III 度鱗癌:不典型鱗狀細胞約占50%~75%,大部分沒有角化,無角珠,周圍炎癥反應不 顯著; IV 度鱗癌:不典型鱗狀細胞占75%以上,核分裂象多,無細胞間橋,無角。2、基底細胞癌:多見于40 歲以上的患者,好發于額面、眼眶、眼瞼、鼻側、耳周圍等處, 惡性程度較底,生長甚為緩慢,病程超過10~20 年者極為常見,初起時多為一增厚的小塊, 逐漸呈隆起向周圍浸潤,很少轉移。鱗狀細胞癌多見于50 歲以上的患者。皮膚癌在我國約 占全部惡性腫瘤的1.5%,南方發病率比北方高。一般認為手掌及腳底不發生基底細胞癌 和鱗狀細胞癌。真皮內有邊界明顯的瘤細胞群,胞核較正常稍大,呈卵形或長形,胞漿少, 細胞間界限不清,細胞間無間橋,因此,像很多細胞核密布在一個共同漿液中,細胞核染色 無顯著差異。有時可見細胞多核或核深染或呈不規則星狀核。瘤細胞群周圍結締組織增生, 在最外層排列成柵狀的栓狀細胞,瘤組織周圍常可見到許多幼稚纖維母細胞及成熟的纖維細 胞混雜一起。基底細胞癌間質含有粘蛋白,在制作切片時間質收縮,使間質與腫瘤團塊邊緣 呈裂隙狀分離,對本病診斷有一定意義。
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