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細(xì)胞株
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MARC-145 [Marc-145; Marc 145; Marc145]
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0574-87157013
mingzhoubio@163.com
浙江省寧波市鎮(zhèn)海區(qū)莊市街道興莊路9號
創(chuàng)e慧谷42號樓B幢401室
MARC-145 [Marc-145; Marc 145; Marc145]
MARC-145 [Marc-145; Marc 145; Marc145]
規(guī)格:
貨期:
編號:MZ-0291
品牌:Mingzhoubio
活化細(xì)胞
凍存細(xì)胞
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T25瓶
凍存管
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產(chǎn)品名稱
MARC-145 [Marc-145; Marc 145; Marc145]
商品貨號
MZ-0291
中文名稱
非洲綠猴胚胎腎細(xì)胞
細(xì)胞數(shù)量
1*10^6
組織來源
小腸;上皮細(xì)胞;自發(fā)永生
細(xì)胞污染
HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測陰性。
生長特性
貼壁
培養(yǎng)基
DMEM(高糖)+10%FBS
形態(tài)特征
該細(xì)胞系來源于一非洲綠猴的胚胎腎組織。
培養(yǎng)條件
Atmosphere: Air, 95%; CO2, 5%。Temperature: 37℃
細(xì)胞傳代步驟
如果細(xì)胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中
復(fù)蘇細(xì)胞步驟
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
細(xì)胞凍存步驟
:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例;1.細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml完全培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
細(xì)胞凍存
Freeze medium: 50% basal medium+40% FBS+10%.DMSOStorage temperature: liquid nitrogen vapor phase
細(xì)胞運輸
干冰運輸(2ml凍存管)或活細(xì)胞運輸(T25細(xì)胞瓶)
序號
文章標(biāo)題
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1
ATCC細(xì)胞運輸和處理
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其他海外品牌代理
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1438578920
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2088210172
沈經(jīng)理
19548299266
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