一、產品簡介

1. 產品名稱：人胎盤絨毛膜滋養層細胞

2. 組織來源：胎盤組織

3. 產品規格：5×105cells/T25細胞培養瓶

4. 人胎盤絨毛膜滋養層細胞簡介：

人胎盤絨毛膜滋養層細胞分離自胎盤組織；胎盤（placenta）是哺乳動物妊娠期間由胚胎的胚膜和母體子宮內膜聯合長成的母子間交換物質的過渡性器官，由羊膜、葉狀絨毛膜和底蛻膜構成。胎兒在子宮中發育，依靠胎盤從母體取得營養，而雙方保持相當的獨立性。胎盤還產生多種維持妊娠的激素，是一個重要的內分泌器官。有些爬行類和魚類也以胎生方式繁殖后代，胚胎生長出一些輔助結構如卵黃囊、鰓絲等與母體組織緊密結合，以達到母子間物質的交換，這樣的結構稱假胎盤。絨毛膜是由滋養層和胚外中胚層的壁層構成。胚泡植入子宮內膜后，在胚泡表面形成許多絨毛樣的突起，以細胞滋養層為中軸，外裹合體滋養層，稱初級干絨毛。胚外中胚層長入初級干絨毛的中軸，使初級干絨毛變成了次級干絨毛。當絨毛膜的胚外中胚層內形成血管網和結締組織，并與胚體內的血管相通時，次級干絨毛改稱三級干絨毛。三級干絨毛末端的細胞滋養層細胞形成細胞滋養層殼。隨著胚胎發育，叢密絨毛膜與基蛻膜共同構成了胎盤，而平滑絨毛膜則和包蛻膜一起逐漸與壁蛻膜融合。 明舟生物生產的人胎盤絨毛膜滋養層細胞采用胰蛋白酶-DNA酶聯合消化法結合密度梯度離心法制備而來，細胞總量約為5×105cells/瓶；細胞經Cytokeratin-7免疫熒光鑒定，純度可達85%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

5. 培養基信息：

DMEM-F12、FBS、EGF、bFGF、Insulin、Penicillin、Streptomycin等

我們推薦使用人胎盤絨毛膜滋養層細胞專用完全培養基作為體外培養人胎盤絨毛膜滋養層細胞的培養基。

二、人胎盤絨毛膜滋養層細胞培養狀態

發貨時發送細胞電子版照片

三、使用方法

在技術部標準操作流程下，此細胞不建議傳代，請您收到細胞后盡快進行相關實驗。

客戶收到人胎盤絨毛膜滋養層細胞后，請按照以下方法進行操作。

1. 取出T25細胞培養瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置3-4h，以穩定細胞狀態。

2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養。

3. 人胎盤絨毛膜滋養層細胞傳代

1) 吸出T25細胞培養瓶中的培養基，用PBS清洗細胞一次；

2) 添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至培養瓶中，輕微轉動培養瓶至消化液覆蓋整個培養瓶底后，吸出多余胰蛋白酶消化液，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后，再加入5ml完全培養基終止消化；

3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2-1:3適當的比例進行接種傳代，然后補充新鮮的完全培養基至5mL，置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置培養；

4) 待細胞完全貼壁后，培養觀察；之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養基。

四、注意事項

1. 培養基于4℃條件下可保存3-6個月。

2. 在細胞培養過程中，請注意保持無菌操作。

3. 傳代培養過程中，胰酶消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態。

4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態，便于和技術部溝通；由于運輸的原因，個別敏感細胞會出現不穩定的情況，請及時和我們聯系，詳盡告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。

5. 該細胞只可用于科研。

備注：由于實驗所用試劑、操作環境及操作手法的不同，以上方法僅供各實驗室參考