人妻少妇偷人精品无码丨色婷婷av久久久久久久丨欧美xxxx做受性欧美88丨欧洲女人牲交视频免费丨亚洲精品久久久av无码专区

熱門搜索:A549    293T 金黃色葡萄球菌 大腸桿菌 AKK菌
購物車 1 種商品 - 共0元
當前位置: 首頁 > 行業資訊 > 鴨胚胎成纖維細胞(永生化)

鴨胚胎成纖維細胞(永生化)

鴨胚胎成纖維細胞(永生化)特性

1 來源:鴨胚胎

2 形態:成纖維細胞樣,貼壁生長

3 含量:>1x106 /mL

4 污染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性

5 規格:T25瓶或者1mL凍存管包裝

運輸和保存

可選擇干冰運輸及發送復蘇存活細胞方式

1)干冰運輸,收到后立即轉入液氮或者-80度冰箱凍存或直接復蘇;

2)存活細胞,收到后應繼續生長,傳代達到細胞生長狀態良好時,再進行凍存。具體操作見細胞培養步驟。

3)收到細胞后請拍照,3天內如果發現污染,請及時拍照與我們聯系。

鴨胚胎成纖維細胞(永生化)用途:僅供科研使用。      

細胞接收后的處理:

1 收到細胞后,請檢查發貨培養瓶的狀況,若發現培養瓶破損、有液溢出及細胞有污染,請拍照后及時聯系我們。

2 在顯微鏡下確認細胞生長狀態時,最好在低倍鏡(45X物鏡)下進行,能準確判斷細胞的傳代密度。看細胞的形態請在10X20×物鏡下,同時給剛收到的細胞拍照,(10×20×)各2-3張以及培養瓶外觀照片一張留存,作為細胞需要售后時提供收到細胞時細胞狀態的依據。

3 觀察好細胞狀態后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養箱放置約2-3h

4 貼壁細胞:在運輸過程中貼壁細胞會有脫落的現象,如發現貼壁細胞有脫落或者脫落后抱團生長,可將T25瓶置于37℃培養箱放置約2-3h,然后抽出瓶中的培養基和未貼壁細胞1000rpm離心5分鐘,棄去上清重懸后接種到加有按照說明書細胞培養條件新配制的完全培養基的原培養瓶中(或新的培養瓶中)。

5 懸浮細胞T25瓶置于37℃培養箱放置約2-3h,然后抽出瓶中的培養基和細胞1000rpm離心5分鐘,棄去上清重懸后接種到新的培養瓶中(加入按照說明書細胞培養條件新配制的完全培養基)。

6)備注:運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞,請換用按照說明書細胞培養條件新配制的完全培養基來培養細胞。  收到細胞后第一次傳代建議12傳代

鴨胚胎成纖維細胞(永生化)培養步驟

一.鴨胚胎成纖維細胞(永生化)培養基及培養凍存條件準備:

1 準備D/F12培養基;優質胎牛血清,10%;添加5ug/ml胰島素,5ng/ml bFGF1ug/ml氫化可的松,50ug/ml抗壞血酸(維C),7.5mM L-glu;雙抗,1%

2 培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5% 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%

3 凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配。

二. 細胞處理:

1 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入250px皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。

2 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。

對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:

1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

2. 2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。

3. 6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。

4. 收到細胞后首次傳代推薦將細胞懸液按12的比例分到新的含6ml培養基的新皿中或者瓶中,建議凍存一支備用,后續傳代根據實際情況按1:21:5的比例進行。

細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。

下面T25瓶為例;

1細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,細胞變圓脫落后,加入2ml完全培養基終止消化,可使用血球計數板21000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。明舟生物(mingzhoubio)按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。

3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

主站蜘蛛池模板: 亚洲乱码中文字幕小综合| 182tv午夜福利在线地址二| 久久综合狠狠综合久久综| 国产一区二区丝袜高跟鞋| 免费吃奶摸下激烈视频| 免费看无码毛视频成片| 国产av福利第一精品| 国产成人精品s8视频| 无码熟妇αⅴ人妻又粗又大| 少妇一边呻吟一边说使劲视频| 欧美性大战久久久久久久| 欧美饥渴熟妇高潮喷水| 欧美大波少妇在厨房被| 午夜影视免费| 伊人久久大香线蕉亚洲| 在线精品视频一区二区| 久久66热人妻偷产精品9| 夜夜爽日日澡人人添| 亚洲日本中文字幕天天更新| 精品国产一区二区三区av片| 色屁屁www影院免费观看| 国产成人一区二区三区在线| 日本在线高清不卡免费播放| 国产粉嫩小泬在线观看泬| 中文无码日韩欧av影视| 亚洲欧美日韩精品久久| 国产精品一区二区av| 亚洲另类欧美在线电影| 国语自产精品视频在线看| 日本丰满白嫩大屁股ass| 亚洲成a人片在线播放| 国产一卡二卡四卡无卡免费| 成人国产一区二区三区| 亚洲-av-无限看| 精品无码成人网站久久久久久| 华人少妇被黑人粗大的猛烈进| 国语国产精精品国产国语清晰对话 | 精品动漫一区二区无遮挡| a一区二区三区乱码在线 | 欧洲| 人妻熟女 视频二区 视频一区| 日日摸日日碰夜夜爽无|