細胞懸液制備后，需要計算懸液中所含細胞數(shù)量；一般以細胞數(shù)/mL 表示。因只有健康的細胞才有活力，接種后能夠生長增殖，所以在接種關應先檢查一下細胞的活力。
（1） 計數(shù)板
用 96% 酒精沖洗計數(shù)板后，用干凈鹿皮擦凈，另擦凈蓋片一張；把蓋片覆在計數(shù)板上面，使之微微移向一側，露出計數(shù)板臺面少許，以便滴加細胞懸液。
（2） 染色
取吸管 1 支，伸入培養(yǎng)瓶中，輕輕反復吹打細胞懸液使細胞重懸均勻后，立即吸細胞懸液少許，向另一離心管中滴入細胞懸液 9 滴，再滴入臺盼藍染液 1 滴，混勻，置 2~3 分鐘。
（3） 加懸液
把計數(shù)板平放在顯微鏡臺上，立即從計數(shù)板邊緣輕輕滴 1~2 滴已染色的細胞懸液，使之充滿計數(shù)板和蓋片間空隙中。
（4） 鏡檢
鏡下觀察可見細胞分散各處，健康細胞胞體完整，透明不著色，凡著色細胞均為不健康者。計算四角大方格內的細胞數(shù)；壓中線者只計算左線和上線者，右線和下線不計算在內（即僅計算壓兩個邊的細胞）。
（5） 接種
培養(yǎng)通過計數(shù)測知懸液中細胞數(shù)后，可根據(jù)實驗所需細胞數(shù)量向培養(yǎng)容器中接種。細胞接種數(shù)量隨實驗目的、血清含量和細胞生物性狀而定；一般接種量在 1~10 × 105 細胞/mL 范圍，實驗周期短，希望細胞增殖較快時，接種量可大些。用含血清量大的培養(yǎng)液培養(yǎng)胚胎來源細胞、無限細胞系和惡性細胞系時，細胞接種數(shù)量不宜太大。
（1） 向計算板中滴細胞懸液時要干凈利落，勿令液面蓋過蓋片，加量要適當，過多易使蓋片漂移，過少易出現(xiàn)氣泡，不理想時應重做。
（2） 鏡下計數(shù)時，偶見有由兩個以上組成的細胞團，應按單個細胞數(shù)計算，如細胞團數(shù)占 10% 以上，說明消化不充分；功細胞數(shù)少于 200 個 / 10 mm2 或多于 500 個 / 10 mm2 時，均說明稀釋不當，需重新制備細胞懸液，再重計數(shù)。
（3） 經(jīng)常使用同一細胞在相同條件下工作時，對各種情況已做到心中有數(shù)情況下，可略去某些環(huán)節(jié)，如染色檢查等；計算板計算細胞數(shù)法有一定誤差，用作測定細胞生長曲線時，每一樣品應重復計算 4 次，取均值，較為可靠，若有電子細胞計數(shù)儀器當然更好。
（4） 體外培養(yǎng)細胞在懸液中呈圓形，平均直徑 8~10 μm，當被接種到底物上生長時，經(jīng)過延展后，則呈扁形，在底物上所占的面積按直徑算可達 20~25 μm，則 1 cm2 的底物上可容納 4~5 萬個這樣的細胞，這是理論上的數(shù)值，但在實際應用中，當細胞達到 80 % 匯合狀態(tài)時便應做傳代處理，因此細胞數(shù)量比上述理論數(shù)量少。
