原代細(xì)胞是來(lái)源于不同組織器官，胚胎及血液的新鮮樣本經(jīng)特殊實(shí)驗(yàn)方法處理而制備的原初培養(yǎng)細(xì)胞，這一過(guò)程被稱為原代細(xì)胞分離。原代細(xì)胞具有保持原有細(xì)胞的基本性質(zhì)，如果是正常細(xì)胞，仍然保留二倍體數(shù)。
細(xì)胞的分離純化和細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)。我們通常把第一代至第十代以內(nèi)的培養(yǎng)細(xì)胞統(tǒng)稱為原代細(xì)胞。原代細(xì)胞培養(yǎng)是指將組織從動(dòng)物體內(nèi)取出，經(jīng)各種酶(常用胰蛋白酶)、螯合劑(常用EDTA) 或機(jī)械方法剪碎處理，分散成單細(xì)胞，在合適的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，使細(xì)胞得以生存、生長(zhǎng)和繁殖的過(guò)程。
實(shí)驗(yàn)流程
原代細(xì)胞分離和培養(yǎng)基本步驟
1、器官和組織的選擇
盡可能的去除不必要的組織和血跡。
2、原代細(xì)胞的分離
（1）應(yīng)用原代細(xì)胞分離試劑盒。
3、原代細(xì)胞的培養(yǎng)：
（1）原代細(xì)胞特制培養(yǎng)基
（2）原代細(xì)胞特制添加物
4、細(xì)胞的培養(yǎng)和鑒定：
原代細(xì)胞鑒定試劑盒
4、原代細(xì)胞的傳代、保存
（1）傳代：依椐細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)，生長(zhǎng)的細(xì)胞1：2或1：3進(jìn)行傳代。
（2）保存：DMSO＋培養(yǎng)液＋血清
按下列順序降溫：室溫→4℃（20分鐘）→冰箱冷凍室（30分鐘）→超低溫冰箱（－80℃ 過(guò)夜）→液氮。
5、原代細(xì)胞的復(fù)蘇
（1）取出細(xì)胞，迅速放入37℃溫水中快速解凍。
（2）吸出細(xì)胞懸液，并加10倍以上培養(yǎng)液。
（3）用培養(yǎng)液適當(dāng)稀釋后接種培養(yǎng)瓶，放入37℃ CO2 培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng)。
項(xiàng)目周期
根據(jù)具體細(xì)胞的性質(zhì)不同培養(yǎng)周期長(zhǎng)短略有差異，常規(guī)參考周期為2~3周左右
交付內(nèi)容
1．符合要求的原代細(xì)胞系；
2．鑒定報(bào)告；
